前言
卵巢癌(ovarian carcinoma)是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，其发病率、病死率均居妇科恶性肿瘤前线。现在建设卵巢癌动物模子的要领有自觉性的卵巢肿瘤动物模子、体外转化卵巢上皮细胞的移植瘤、致癌物诱发卵巢肿瘤以及基因工程卵巢肿瘤动物模子。
近年来，随着新手艺生长，基因工程刷新小鼠的卵巢上皮性癌模子逐渐生长及应用起来。与以往古板化学致癌物诱导动物模子相比，使用转基因手艺将肿瘤形成相关基因转入动物体内举行表达而建设的肿瘤模子的致癌历程和病理体现更靠近人体。并且，在肿瘤形成的诱导历程中，可在自然状态下促使正常细胞向肿瘤细胞演变，同时种种癌前病变均可显示，从而更利于举行肿瘤形成的研究。
部分造模要领
使用动物：大鼠
【造�；啤浚�
使用转基因手艺，将基因的DNA片断注入受精卵或用重组病毒携带目的基因熏染早期胚胎，使出生的小鼠表达有某个目的基因，如一些癌基因，从而视察这个基因对肿瘤爆发的影响。现在用转基因鼠去研究卵巢癌的爆发生长，集中在卵巢特异性的启动子是为了确保目的基因仅 在卵巢上皮细胞(ovarian surface epithelium,OSE)表达而不在其他组织中表达，从而更好地模拟人类卵巢癌的爆发。
【造模要领】：
1.显微注射法制备转基因动物模子 用于显微注射的卵巢癌转基因动物模子的启动子有inhibin-alpha、OSP-1和MISⅡR启动子。用inhibinalpha启动子，将SV40 TAg(large SV40 T antigen)用转基因要领使其在粒层细胞表达而诱发了粒层细胞瘤。OSP-1(ovarian specific promoter)启动子能使目的基因特异性地在正常卵巢上皮及卵巢癌细胞表达，当转入LacZ基因后，用X-gal染色要领检测多个器官发明，LacZ的表达仅局限在卵巢。但用OSP-1作为启动子，SV40TAg转基因大鼠肿瘤动物模子中，除卵巢外，其他多处组织还爆发肿瘤，因此，只管OSP-1使目的基因主要在卵巢转录，但真正照旧缺乏特异性，照旧不可阻止地使SV40TAg在其他少数的组织表达而爆发肿瘤。另外一个是启动子MISⅡR (the Mullerian inhibitory substance type Ⅱ receptor),MISⅡR的表达仅局限于胚胎时期苗勒管周围的间质细胞、胚胎管状和裂泡状性腺细胞、成年睾丸的Sertoli和Leydig细胞，卵巢的粒层细胞，其有强盛的启动功效和对卵巢有特异性，在人卵巢癌细胞系中可见有MISⅡR的表达。2003年，Connolly等首次乐成通过苗勒管抑制物Ⅱ基因启动子的转基因调控表达早期SV40TAg基因，建设表达浆液性卵巢上皮性癌病例特征的自觉卵巢癌转基因小鼠模子。用MISⅡR作为启动子将SV40TAg受精卵显微注射的要领爆发转基因鼠，出生后能够凌驾50％的小鼠双侧卵巢爆发卵巢癌，但也有肾和脑肿瘤的爆发。
2.重组病毒携带目的基因直接囊内注射诱发卵巢肿瘤 将重组的携带有目的基因的腺病毒用内注射的要领注射到小鼠卵巢的包膜下，通过腺病毒熏染OSE细胞，而将目的基因转导入OSE细胞，这种要领能够很好地模拟在早期卵巢癌爆发时体细胞突变时的情形。最近有报告用这种要领将Cre-loxP转入OSE细胞，从而阻断了p53和Rb的表达而爆发肿瘤。因小鼠卵巢襄能局限性转达Cre重组腺病毒，大宗学者将其运用于卵巢外貌上皮，使Cre重组酶－P1交流位点序列(Cre-LoxP)中介的基因失活，条件性地表达肿瘤抑制基因，从而建设卵巢癌基因工程模子。
姚德生用携带有c-Myc和k-Ras基因的重组反转录病毒熏染OSE后，将Ras和RM组细胞腹腔注射于裸鼠体内，乐成制备小鼠卵巢癌动物模子。突变的k-Ras作为一个癌基因，能够增进OSE细胞的增殖，付与OSE侵袭的能力，同时可使OSE爆发恶性转化。c-Myc作为一个核转录调理因子，单独不可使细胞增殖加速，也不可使OSE爆发恶性转化，在体内也不可形成肿瘤，但可协同其他因子如k-Ras，增强其功效，付与细胞更强的生长和侵袭能力。
【模子的评估和应用】：
转基因鼠卵巢癌动物模子是研究卵巢癌爆发的极为有价值的动物模子，这种模子通过种种各样的要领，去相识和研究种种因素对卵巢癌爆发所起的作用，特殊是一些癌基因和抑癌基因在肿瘤爆发生长历程中是怎样施展作用的，可以通过使用具有差别遗传配景的品系的小鼠，研究差别因素的相互作用，好比可以选用差别排卵频率、差别激素水平的品系而使实验抵达差别目的。这种模子还可以资助我们相识肿瘤是怎样从OSE细胞变为肿瘤细胞，这种转基因的模子差别于以往的移植瘤模子，这种模子可以研究一些遗传致病因素在卵巢癌爆发的差别时期的作用，特殊是早期刚刚最先爆发癌变时，如原位癌阶段。此模子可作为评估分子靶向治疗的临床前期模子，尤其关于一些特定的上皮性卵巢癌亚型更有临床意义。使用转基因手艺将肿瘤形成相关基因转入动物体内举行表达建设的肿瘤模子的致癌历程和病理体现更靠近人体，从而为探索人卵巢癌的病因及发病机制、发病历程、转移、多药耐药等生物学行为提供了一种可靠手段。
参考文献：
1.尹爱兰，钟梅，孙桂芹，等．绿色荧光卵白标记的人卵巢癌裸鼠原位移植模子的建设．南方医科大学学报，2008,28 (3):484-486
2.闫忠鑫，韩凤娟，翟小龙，等．卵巢癌裸鼠移植瘤模子比照和可视化研究希望．天下中西医团结杂志，2012, 7 (7):636-638
3.邱丽楠，韩风娟，范显着，等．两种诱发Fischer344大鼠卵巢癌动物模子建设要领的较量. 天下中西医团结杂志，2010,5(6):488-490
4.姚德生．重组反转录病毒介导的k-Ras/c-Myc小鼠卵巢癌动物模子的建设和抑癌基因OPCML的克隆及其在卵巢癌中的功效研究．广西医科大学博士学位论文，2005
5.黎静，王雪飞，钟梅．整体可视化卵巢癌原位及转移动物模子的建设．广东医学，2012, 33 (7):887-889
6.瞿全新，糜若然. 转基因动物在卵巢肿瘤研究中的应用．外洋医学妇产科学分册，2003,30 (6):391-393
7.Connolly DC, Bao R, Nikitin AY, el al. Female mice chimeric for expression of the simian virus 40 TAg under control of the MlSilR promoter develop epithelial ovarian cancer, Cancer res 2003, 63 (6): 1389-1397
8.Dutertre M, Couédard L, Xavier F, el al. Ovarian granulosa cell tumors express a functional membrane receptor for anti-Müllerian hormone in transgenic mice. Endocri.nology, 2001, 142 (9):4040-4046
9.Carson K, Macdonald E, Dube M, et al. Generali on of tumors in transgece mice expressing the SV40 T antigen under the control of ovarian-specific promoter 1. J Soc Cynecol lnvestig,2003,10(4):244-250
10.Hoffman RM. Orthotopic metastatic (MetaMouse) models for discovery and development of novel chemotherap. Methods Mol Med,2005, 111 :297-322
11.Kananen K, Markkula M, Rainio E, et al. Gonadal tumorigenesis in transgenic mice bearing the mouse inhibin alpha-subunit promoter/simian virus T-antigen fusion gene: characterization of ovarian tumors and establishment of gonadotropin-responsive granulosa cell lines. Mol Endocrinol, 1995,9 (5):616-627
12.Selvakumaran M, Bao R, Crijns AP, el al. Ovarian epithelial cell lineage-specific gene expression using the promoter of a retrovirus-like element. Cancer Res,2001, 61 (4):1291-1295
