前言
角膜新生血管(ehoroidal neovascularization,CNV)常导致角膜透明度降低 ，是致盲的一个主要缘故原由 ，也是角膜移植术后爆发倾轧反应的高危因素。临床上CNV治疗仍是最棘手的问题之一。CNV动物模子属于诱发性疾病动物模子 ，通过物理要领（热烧烙术和角膜缝线法等）、化学要领（碱性化学药物烧伤等）、生物要领（角膜囊袋判断法）和手术要领（异种角膜移植、角膜基质内注射牛清卵白、角膜基质肿瘤组织植入术等）可人为地诱发动物的角膜新生血管增生 ，爆发类似于人类疾病的模子。下面主要先容角膜新生血管研究最常用的要领——角膜囊袋判断法。常用的诱导剂有内毒素、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、二氧化硅等 ，以缓释内毒素和bFGF缓释药丸诱生角膜新生血管动物模子的制作为例 ，举行简朴先容。
部分造模要领
使用动物：实验动物
【造� ；�】：
内毒素诱生的CNV继发于炎症反应 ，并且炎症刺激反应与新生血管的诱生呈正相关 ，内毒素诱生新生血管历程可能受巨噬细胞渗透的bFGF因子调控 ，并且被巨噬细胞渗透的其他因子如肿瘤坏死因子-α和转化生长因子-β放大。
bFGF是包括146个氨基酸具有重大功效的单链肤 ，在一系列体外实验中 ，被证实具有对血管内皮细胞分解、增殖、迁徙和趋化作用。bFGF诱导的微血管内皮细胞可爆发大宗的µ-PA ，在血管天生早期起中心作用 ，µ-PA将纤维卵白溶酶原转化成具有酶活性的纤维卵白溶酶 ，后者又可激活胶原酶 ，消融新生血管起始缘的基膜 ，并导致内皮细胞进入三维的胶原基质 ，形成新的毛细血管芽。
【造模要领】：
缓释内毒素聚合物药丸的制备：乙烯－醋酸－乙烯脂聚合物(Elvax)珠接纳高纯的己醛洗濯至分光光度纯 ，在室温下将聚合物溶于二氯甲烷至10％(W/N)最终浓度 ，将一定比例E.Coli内毒素与10％Elvax混淆并强力搅拌至匀称悬液。内毒素－Elvax悬液用消毒滴管滴入8孔玻璃板聚合 ，完全聚合后 ，制成1mm3巨细 ，（1.3±0.3)mg/丸 ，紫外线消毒后-40℃蕴藏备用。
bFBF缓释药丸的制备：bFBF缓释药丸由缓释剂聚甲基丙烯酸－2－羟乙酯(Hydron)和一定量的诱导剂bFGF混淆而成 ，在bFGF-Hydron缓释药丸中加入一定量的硫糖铝(sucralfate) ，制成Hydron包裹的bFGF-sucralfate缓释药丸 ，可有用地稳固bFGF的生物活性 ，减缓bFGF的释放。
角膜囊袋制作：所有手术办法均在无菌条件下举行 ，3％戊巴比妥钠兔耳缘静脉注射全身麻醉(25mg/kg), 1％地卡因局部点眼麻醉 ，在角膜中央作1.5mm、1/2角膜厚度切口 ，向6点位潜行疏散1/2厚角膜囊袋 ，至距角膜缘2.0mm处 ，接纳玻璃套管植入制备好的缓释药丸 ，将囊袋切口重新复位 ，以便愈合。
【模子特点】：
CNV与局部内毒素呈剂效依赖关系。用浓度为15％内毒素聚合物能获得显著的角膜新生血管生长 ，仅伴有稍微的角膜水肿 ，能诱生相宜的CNV动物模子 ，内毒素浓度过高则引起显著的角膜炎症 ，基质混浊并且新生血管生长易融合 ，影响新生血管丈量和盘算的准确性 ，浓度太低则诱导力度过小 ，不适合模子的要求。
【模子评估和应用】：
缓释内毒素聚合物药丸诱生CNV模子的优点是：新生血管定向成束生长 ， 重复稳固 ，测定和定量剖析的准确性显着提高 ，并且可接纳盘算机图像剖析系统举行逐日一连动态定量测定 ，利便与比照组较量。
bFGF缓释药丸诱生的CNV动物模子的优点在于：bFGF作为新生血管的直接刺激因子 ，可扫除炎症等间接新生血管刺激因素 ，这关于特定的新生血管抑制剂的疗效评价有主要意义 ；便于定量剖析 ；稳固性和重复性俱佳且经济适用。
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