? ? ? ? ?病原微生物是指可以侵监犯体 ，引起熏染甚至熏染病的微生物 ，或称病原体。病原体种类很是多 ，包括病毒、细菌、真菌和其他微生物等。
在科研方面 ，微生物学检测已经成为分子生物学建设的支柱之一 ，基因工程、生物工程、遗传生物学的建设与生长都离不开微生物学的基��；在临床方面 ，基于病原学证据的抗熏染治疗也将病原微生物检测视为金标准 ，关于改善患者病情与预后 ，预防和控制情形熏染有着重大的意义。
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微生物检测手艺纵览
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我们获得的样本中 ，一样平常都会保存多种细菌 ，此时需要将样本举行疏散作育 ，一样平常分为平板疏散作育或血作育。
当平板作育或血作育泛起阳性效果时 ，需要举行微生物判断。判断一样平常分为三个条理 ，其一为菌落形态判断 ，其二为染色镜检判断 ，其三为生化判断 ，三者团结举行效果判断。而当阳性样本泛起多菌种时 ，需要重新采样举行疏散作育及纯化作育。
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1 染色镜检
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病原微生物体形细小 ，大多无色半透明状 ，若是肉眼视察菌落形态还无法判断的话可将其染色后可借助显微镜视察其巨细、形态、排列等 ，能够关于形态特殊的病原体举行直观的检查 ，不需要特殊的仪器和装备。
2 生化判断
? ? ? 生化要领检测病原微生物现实上是测定微生物特异性酶。由于种种微生物所具有的酶系统不完全相同 ，对许多物质的剖析能力亦纷歧致。因此可使用差别底物爆发的差别代谢产品来间接检测该微生物内酶的有无 ，从而抵达检测特定微生物的目的。
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基因层面的检测手艺能够改善古板检测历程中应用外部形态和心理特征举行检测的现状 ，能够接纳特有的基因片断序列对病原微生物的种类举行判别 ，以是基因检测手艺以其自身独到的优势被临床医学磨练领域普遍应用。
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1 聚合酶链反应(PCR)
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聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ，PCR)是一种在体外是用已知寡核苷酸引物指导未知片断中微量待测基因片断并举行扩增的手艺。由于PCR可以看待测基因举行扩增 ，特殊适用于病原体熏染早期的诊断。PCR手艺在近20年里生长迅速 ，从基因扩增到基因的克隆和刷新以及遗传剖析 ，可靠性逐步提高。
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温江医学城·分子生物学实验室 |
QuantStudio3?荧光实时定量剖析系统 |
2 基于16S rRNA的检测手艺
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随着测序手艺生长 ，DNA大规模测序得以举行 ，现阶段种种常见细菌的16S rRNA基因险些所有测序完成 ，它们相对稳固且有较高的拷贝数(每个细胞几千个拷贝) ，其序列中含可变区及高度守旧区 ，因此可设计群、属、种特异性的探针。
16S rRNA编码基因的这些特点使之成为较理想的细菌基因分类的靶序列 ，逐渐成为细菌判断、分类的热门检测手艺。16SrRNA检测手艺使用现有病原菌标准菌株制作DGGE(变性梯度凝胶电泳)标准marker ，然后对疑似“病原菌”扩增16SrRNA举行DGGE剖析 ，这样可以做到快速检测。
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基因簇（KO）品貌热图 |
种水平的细腻组成图 ? |
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1 血清学检测
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接纳血清学检测能够对病原微生物举行快速判断 ，血清学检测手艺的基来源理是通过已知的病原体抗原以及抗体对病原体举行检测 ，与古板的细胞疏散作育相比 ，血清学磨练的操作办法简朴 ，其常用的检测要领之一则为酶联免疫测试手艺等。酶联免疫测试手艺的应用能够大幅度提高血清学检测的敏感性和特殊性 ，不但能够对检测样本中的抗原举行检测 ，还能够检测抗体因素。
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酶联免疫实验室 |
全波长酶标仪 |
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2 药敏实验
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古板药敏试验一样平常分为纸片扩散法、稀释法、快速药敏 E-test三种要领 ，判断标准为最低抑菌浓度MIC值和抑菌圈直径KB值。
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制片扩散法：
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纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂外貌上 ，纸片中的药物在琼脂中扩散 ，随着扩散距离的增添 ，抗菌药物的浓度呈对数镌汰 ，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时 ，纸片周围抑菌浓度规模内的菌株不可生长 ，而抑菌规模外的菌株则可以生长 ，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈 ，差别的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速率的影响而可能差别 ，抑菌圈的巨细可以反应测试菌对药物的敏感水平 ，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。
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稀释法：
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稀释法药敏试验可用于定量检测待测细菌看待验证抗菌药物的抗药性或敏感性 ，分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时 ，抗菌药物的浓度通常经由倍比稀释 ，能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度（MIC） ，一个特定抗菌药物的测试浓度规模应该包括能够检测细菌的诠释性折点（敏感、中介和耐药）的浓度 ，同时也应该包括质控参考菌株的MIC。
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抑菌实验效果1-常量肉汤稀释法
注：图A直接视察；图B加TTC试剂染色视察
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? ? ? 除此之外 ，免疫学手艺、多重PCR手艺、核酸杂交手艺、基因芯片手艺、环介导等温扩增手艺、链置换扩增手艺、重组酶聚合酶扩增手艺、宏基因组测序手艺(mNGS)、靶向基因组测序手艺(tNGS)、质谱剖析手艺也被大宗应用于微生物检测中。随着人类关于病原微生物的检测手段的一直升级 ，希望关于未来生命科学行业有着新的启示。
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