注：以下所有样本只管新鲜！
1、动物组织收罗（样本量只管包管在绿豆巨细，约200mg以上）
① 取材应在冰上举行，取材后组织专心理盐水冲洗清洁，去除血渍和污物，并剔除非研究所需的组织；
② 吸干水渍并切小块，放入已标记的冻存管中，液氮速冻后，转运至-80℃冰箱生涯 。
2、贴壁细胞RNA收罗样本（样本量1*10^8以上）
RNA试剂盒法：
① 用微量移液器将细胞作育液吸除清洁，加入1ml 4℃预冷PBS溶液，轻摇洗涤；
② 将PBS吸除清洁后，再加入1ml PBS，用细胞刮网络细胞，3000rpm离心10min，弃去上清液，网络细胞沉淀，液氮速冻后转运至-80℃冰箱生涯；
③ 使用RNA提取试剂盒提取RNA，详细提取要领以试剂盒说明书为准 。提取样本经液氮速冻后转运至-80℃冰箱生涯 。
Trizol法：
① 贴壁细胞作育或处置惩罚竣事后，去除作育液；
② 每10c㎡作育面积加入1ml Trizol试剂；
③ 用1ml枪头重复奏乐,使Trizol与细胞充分接触并消化；
④ 将上述溶液转移到试管中，用一次性注射器（或者枪头）重复奏乐细胞，直至看不见成团的细胞块，使溶液泛起清亮且不粘稠的状态；
⑤ 经液氮速冻后转运至-80℃冰箱生涯 。
3、悬浮细胞RNA收罗（样本量1*10^8以上）
RNA试剂盒法：
① 悬浮细胞作育或处置惩罚竣事后，3000rpm，离心10min，去除作育液；
② 网络细胞后，加入1ml 4℃预冷PBS溶液，轻摇洗涤，3000rpm，离心10min，弃去上清液，网络细胞沉淀，液氮速冻后转运至-80℃冰箱生涯；
③ 使用RNA提取试剂盒提取RNA，详细提取要领以试剂盒说明书为准 。提取样本经氮速冻后转运至-80℃冰箱 。
Trizol法：
① 悬浮细胞作育或处置惩罚竣事后，离心网络细胞，去除作育液
② 保存的细胞用PBS快速洗一次，离心除去PBS；
③ 每1×10^6个细胞加1ml Trizol试剂，用一次性注射器举行重复奏乐直至看不见成团的细胞块，整个溶液呈清亮且不粘稠的状态；
④ 经液氮速冻后转运至-80℃冰箱生涯 。
4、血液样本收罗
全血样本(以下要领办法仅供参考）
哺乳动物需要收罗白细胞举行后续实验，（详细要领需参考种种疏散液试剂说明书）
① 将新鲜全血网络于抗凝管中，上下轻轻倒置一再使血液与抗凝剂充分混匀，置于4°C或冰盒中正立安排；
② 每1ml新鲜抗凝血中加入10ml红细胞裂解液，轻轻奏乐混匀，裂解4-5分钟；
③ 加入20-30ml PBS、HBSS、心理盐水或无血清作育液；
④ 2400rpm-2700rpm离心5分钟，弃红色上清；
⑤ 重复办法③和办法④，直至红细胞裂解完全，网络细胞沉淀；
⑥ 每1×10^6个细胞加入1ml Trizol试剂，液氮速冻后，转运至-80℃冰箱生涯 。
5、血清样本收罗（备注：因其RNA品貌很低，PCR可能扩增不出来）
① 用无抗凝剂血清管网络全血样本，预留一定空间便于血清疏散，置于4°C或冰盒中正立静置10-20分钟；
② 3000-3500rpm，离心10-15分钟，取上清于离心管（RNasefree）中;
③ 将分装好的血清转运至-80℃冰箱生涯 。
6、血浆样本收罗（备注：因其RNA品貌很低，PCR可能扩增不出来）
① 将新鲜全血网络于抗凝管中，上下轻轻倒置一再使之与抗凝剂充分混匀，置于4°C或冰盒中正立静置10-20分钟；
② 3000-3500rpm，离心10-15分钟，取上清于离心管中;
③ 将分装好的血浆转运至-80℃冰箱生涯 。
7、菌类（1*10^8 CFU以上的菌体）
液体作育基：
① 挑取单菌落于50ml液体作育基中，相宜温度作育住宿，并在对数生恒久举行菌体收罗；
② 作育好的菌液适量转入合适的离心管中，高速离心网络菌体，弃去上层作育基，用封口膜封口后液氮速冻，转运至-80℃冰箱生涯，概略积干冰运输；
固体或半固体作育菌种网络：
① 涂布平板作育的微生物，在菌体生产最兴旺时期刮下，置于1.5或2.0ml的离心管中，迅速液氮速冻 。
② -80℃冰箱生涯，转运至-80℃冰箱生涯，概略积干冰运输 。
样本准备注重事项：
① 小体积的昆虫类组织，如寄生蜂、螨等，可思量用RNA�；ぜ辆傩醒就�，RNA�；ぜ恋氖褂貌握帐约了得魇�；
② 所有直接接触样本的试剂、耗材等物品均需要处于无RNA酶（RNasefree）情形；
③ 肝素会影响下游建库测序，EDTA不适用于部分因素剖析及PCR实验，收罗血液样本时需凭证检测需求稳重选择抗凝剂；
④ RNA样本提取可接纳RNA试剂盒、Tirzol法等，注重RNA样本的纯化，阻止多糖多酚、卵白和其它杂质的残留 。提取完成后，提供Nanodrop、AGE或Agilent 2100中一种或多种形式的剖析效果以判断RNA的完整性、浓度、总量是否知足需求 。寄送TotalRNA的需注明提取所用的要领，如试剂盒或Tirzol法等；
⑤ 样本标签勿粘贴在EP管或锡箔纸上，低温下标签纸易脱落，建议使用记号笔标记；
⑥ 细胞样本不建议接纳粘稠�；ぜ辽�，不然将无法离心网络存放在�；ぜ恋南赴�；
⑦ RNAlater、RNAstore等�；ぜ猎�25℃下能稳固生涯样本3天，4℃生涯样本7天、-20℃条件下可恒久生涯样本 。建议用�；ぜ辽牡难竞穸炔涣杓�0.5cm 。�；ぜ敛皇视糜谘汉鸵禾�，组织样本与�；ぜ恋挠昧恐辽傥�1:10，RNAstore不适用于植物样本生涯 。（差别�；ぜ辽氖奔溆胁畋�，详细以�；ぜ了得魇槲迹�；
⑧ Trizol为裂解液，不适用于组织样本的生涯，细胞除外 。当细胞存放在Trizol中需注明每管的细胞数目 。
样本寄送注重事项：
① 样本需要使用干冰举行寄送，干冰消耗量为4-5kg/天（凭证温度会有所变换），订购量以快递现实运输天数为准（避开大型节沐日及线上购物节） 。干冰接纳厚实的泡沫箱举行打包，外侧用透明胶封好；
② 样本寄送我司时需填写《项目送样单》 。送样单中样本信息、数目、分组与编号需与现实坚持一致，纸质版送样单随样本寄出,电子版送样单及寄送快递单号发送给公司，以便核对及备份数据；
③ 在我司完成测序剖析后，剩余样本需要返还的项目，需在收到项目完整版结题报告3个月内联系我司举行样本返还，逾期样本将举行销毁 。若是样本特殊珍贵，需提前说明 。样本返回需要送样方肩负返还用度（包括干冰费和快递费）；
④ 为确保实验的顺遂，送检方需尽可能提供样本，以防部分样本降解重新取材、制备或送样，延伸检测历程 。
