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通用：电镜牢靠液与组织样本建议体积比为20:1，样本生涯和运输历程中牢靠液切勿冷冻结冰

1、动物、植物组织样本要求

① 请尽快牢靠。动物组织最幸亏离体后1min内浸入电镜牢靠液，最先牢靠。

② 非灌注的组织，厚度不凌驾4mm，请用适当方法（好比切宽薄片）体现位置和条理关系。

③ 请用尖锐的薄刀片切组织，朝一个偏向划，不要往返切割，不要挤压、拉扯。

④ 含有食物残渣、大宗血液或其它黏附物的组织，请专心理盐水漂洗，再投入电镜牢靠液。

⑤ 请包管电镜牢靠液量富足，牢靠液和组织的体积比不小于20:1。

⑥ 最幸亏4℃的电镜牢靠液中浸泡，注重严禁结冰（太靠近冰箱后壁或冰袋运输都可能使组织结冰）。

组织尺寸和容器关系（只装一个的参考标准）：

· 芝麻或绿豆大�。ㄈ缧∈笊錾舷伲�请用1.5ml EP管

· 黄豆大�。ㄐ∈笊鲈啵�请用5ml离心管

· 铺展面积类似蚕豆巨细的组织片：请用平底的25ml广口瓶

· 每个容器含有N个组织时：容器体积要适当增大，组织不要相互挤压变形

注重：

① 动物组织容易爆发自溶征象。牢靠不实时，组织结构极有可能破损，若是离体组织需要称重，只管在低温情形举行，并实时牢靠；

② 动物组织块最好快速切取一分钟内把组织（样品）放入电镜牢靠液中。不要凌驾黄豆巨细，不然牢靠液渗透难题，中心组织牢靠欠好，结构破损，植物组织最好切割成1cm左右长度的细条，便于后续取材确定偏向，所有植物样品若有条件只管抽真空致沉底包管样品浸泡在电镜牢靠液中；

③ 特殊要本需要定位（见表格《透射电镜需要举行半薄定位的样本汇总》）的，需要只管取到目的位置，个体需要确定取材偏向（好比肌肉）的，提供的样本能让分清横纵偏向，取材选择部位要准确可靠，确保每块质料都是要视察的部位。

2、细胞样本要求

① 只管用60mm的皿作育细胞，用胰酶消化(1min，若是部分贴壁细胞短时间消化不下来可适当延伸消化时间)或者细胞刮（不建议用细胞刮取，除非视察细胞之间的“毗连”结构）的方法网络于离心管中，通例离心网络细胞（sunbet选择1000rpm*2-5min）；

② 弃去上清液，用吸管沿管壁缓慢加入0.5%戊二醛牢靠液，重悬细胞，4℃情形中静置5min；

③^★ 将办法2的细胞悬液转移至1.5ml尖底EP管中，高速离心（sunbet选择12000rpm*10min）轻轻弃去上清液，保存沉淀，高速离心离紧后的样品体积约半颗小米粒大��；

④ 用吸管沿管壁缓慢加入牢靠液(不可吹散细胞)，网络后不可实时送样，可生涯在4℃情形中；

⑤ 运输条件:放入盛有冰袋的泡沫盒4℃运输至实验室(一定使用1.5ml尖底EP管送样)。

3、细菌、真菌样本要求

① 视察细菌内部结构：直接将固体作育基上可见菌落整体剜下，连同作育基放于电镜牢靠液中，悬浮细菌等先离心网络，其余处置惩罚办法与细胞样本要求完全一致；

② 视察外貌（鞭毛、菌毛、形态）：参考负染样品处置惩罚要领（见下方）。

③ 真菌：真菌样本牢靠要领较特殊、除真菌牢靠液均接纳电镜混淆牢靠液外，处置惩罚办法与细胞样本要求完全一致。

4、精子样本要求

① 网络适量精液（大于1ml）置清洁干燥的盘尼西林小瓶中，放37℃恒温箱约40min液化后，移至离心管中，1500rpm，离心5min，弃去精浆。

② PBS洗涤两次，1500rpm，离心5min，离心去上清，可显着看到沉淀。

③ 用吸管沿管壁缓慢加入约1ml的0.5%戊二醛牢靠液，轻轻奏乐混匀，在4℃情形中静置10min。

④ 再用12000rpm，离心10min，弃去上清液，高速离心后的样品体积不小于半颗小米粒巨细。

⑤ 再用吸管沿管壁缓慢加入牢靠液牢靠即可（不要奏乐混匀），牢靠液与样本建议体积比为20:1。

⑥ 网络后不可实时送样，可生涯在4℃情形中。

⑦ 运输条件：离心弃牢靠液后加新的电镜牢靠液，转移至4℃生涯，放入盛有冰袋的泡沫盒运输至实验室。

5、负染样本要求

① 纳米质料：制备成悬液，重悬的液体不可是有机溶剂（好比丙酮、酒精），样本量不要过少；

② 细菌：提供活菌，可以直接连同固体作育基一起送样，或者提供重悬后的菌液；

③ 外泌体、支原体、衣原体、病毒等：提纯后，直接送样，只管不要冻存，该类样本需与公司提前预约。

注重：

① 负染样本最好能提供100μL左右的提纯样品；

② 提前与公司确定好时间，再准备样品，放入盛有冰袋的泡沫盒运输至实验室，实时开展实验。

③ 建议客户来现场加入采图；不来现场采图客户，需要完善《电镜送样单》内容，注明样本名称，类型，形态、粒径和参考图。

透射电镜需要举行半薄定位的样本汇总

组织类型	组织部位	半薄定位形貌	需半薄定位的部位举例
空腔组织	消化道	常做的消化道组织有胃、肠道等，从食管至直肠，消化道的管壁分为黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜层，如指定视察4层中某一层或者是4层中的特定结构时，需要定位	如黏膜上皮的微绒毛，黏膜下层的血管、肠腺，肌间神经丛等
	呼吸道	常做的呼吸道组织为肺	如视察肺内的气管、巨噬细胞等
	血管	除部分组织其自己血管富厚不需要定位外，一样平常视察组织内血管均需要定位	如血脑屏障、肿瘤组织内的新生血管等
	其他空腔组织	/	如子宫视察内膜等
实体组织	消化腺	主要有胰腺和肝，如胰腺视察胰岛细胞必需定位，肝脏视察血窦、胆管等特殊位置需要定位	如胰腺视察胰岛细胞、肝脏血窦、胆管等特殊位置
	眼球	视察相关详细部位均需定位	如视网膜、角膜、巩膜等
	脑组织	视察海马、胼胝体、黑质等	视察特定脑区等
	脊髓	视察灰质和白质	视察灰质和白质等
	肾脏	视察肾小球	视察肾小球等
	卵巢	视察卵泡细胞	视察卵泡细胞如等原始、初级、次级细胞等
	睾丸	视察各级生细腻胞	视察各级生细腻胞如精原、初级、次级细胞等
	鼻粘膜	视察纤毛	视察纤毛等
	皮肤	视察表皮、真皮或皮下组织	视察表皮、真皮或皮下组织等
造模后组织	植入质料	视察植入质料的位置	如视察植入质料的位置
	损伤区	视察损伤区	如大脑缺血性坏死区等
	肿瘤	视察癌巢的位置	如提供肿瘤组织时不需定位
植物质料	根	一样平常不需定位	如需视察重金属沉积，请提前咨询
	叶	视察叶脉、胚轴、叶鞘	视察叶脉、胚轴、叶鞘等
	花	视察花粉和花蕊	视察花粉和花蕊等
	果实和种子	一样平常均需定位	如玉米籽粒、番茄、土豆等
	其他空腔组织	蕨类植物	视察孢子等
其他	要定位的组织，第1次取材时规模可以适当增大，以包管二次取材能分清组织的种类与偏向

通用：电镜牢靠液与组织样本建议体积比为20:1，样本生涯和运输历程中牢靠液切勿冷冻结冰

1、动物、植物组织样本要求

① 请尽快牢靠。动物组织最幸亏离体后1min内浸入电镜牢靠液，最先牢靠。

② 非灌注的组织，厚度不凌驾4mm，请用适当方法（好比切宽薄片）体现位置和条理关系。

③ 请用尖锐的薄刀片切组织，朝一个偏向划，不要往返切割，不要挤压、拉扯。

④ 含有食物残渣、大宗血液或其它黏附物的组织，请专心理盐水漂洗，再投入电镜牢靠液。

⑤ 请包管电镜牢靠液量富足，牢靠液和组织的体积比不小于20:1。

⑥ 最幸亏4℃的电镜牢靠液中浸泡，注重严禁结冰（太靠近冰箱后壁或冰袋运输都可能使组织结冰）。

组织尺寸和容器关系（只装一个的参考标准）：

· 芝麻或绿豆大�。ㄈ缧∈笊錾舷伲�请用1.5ml EP管

· 黄豆大�。ㄐ∈笊鲈啵�请用5ml离心管

· 铺展面积类似蚕豆巨细的组织片：请用平底的25ml广口瓶

· 每个容器含有N个组织时：容器体积要适当增大，组织不要相互挤压变形

注重：

① 动物组织容易爆发自溶征象。牢靠不实时，组织结构极有可能破损，若是离体组织需要称重，只管在低温情形举行，并实时牢靠；

2、细胞样本要求

② 弃去上清液，用吸管沿管壁缓慢加入0.5%戊二醛牢靠液，重悬细胞，4℃情形中静置5min；

④ 用吸管沿管壁缓慢加入牢靠液(不可吹散细胞)，网络后不可实时送样，可生涯在4℃情形中；

⑤ 运输条件:放入盛有冰袋的泡沫盒4℃运输至实验室(一定使用1.5ml尖底EP管送样)。

3、细菌、真菌样本要求

② 视察外貌（鞭毛、菌毛、形态）：参考负染样品处置惩罚要领（见下方）。

③ 真菌：真菌样本牢靠要领较特殊、除真菌牢靠液均接纳电镜混淆牢靠液外，处置惩罚办法与细胞样本要求完全一致。

4、精子样本要求

① 网络适量精液（大于1ml）置清洁干燥的盘尼西林小瓶中，放37℃恒温箱约40min液化后，移至离心管中，1500rpm，离心5min，弃去精浆。

② PBS洗涤两次，1500rpm，离心5min，离心去上清，可显着看到沉淀。

③ 用吸管沿管壁缓慢加入约1ml的0.5%戊二醛牢靠液，轻轻奏乐混匀，在4℃情形中静置10min。

④ 再用12000rpm，离心10min，弃去上清液，高速离心后的样品体积不小于半颗小米粒巨细。

⑤ 再用吸管沿管壁缓慢加入牢靠液牢靠即可（不要奏乐混匀），牢靠液与样本建议体积比为20:1。

⑥ 网络后不可实时送样，可生涯在4℃情形中。

⑦ 运输条件：离心弃牢靠液后加新的电镜牢靠液，转移至4℃生涯，放入盛有冰袋的泡沫盒运输至实验室。

5、负染样本要求

① 纳米质料：制备成悬液，重悬的液体不可是有机溶剂（好比丙酮、酒精），样本量不要过少；

② 细菌：提供活菌，可以直接连同固体作育基一起送样，或者提供重悬后的菌液；

③ 外泌体、支原体、衣原体、病毒等：提纯后，直接送样，只管不要冻存，该类样本需与公司提前预约。

注重：

① 负染样本最好能提供100μL左右的提纯样品；

② 提前与公司确定好时间，再准备样品，放入盛有冰袋的泡沫盒运输至实验室，实时开展实验。

③ 建议客户来现场加入采图；不来现场采图客户，需要完善《电镜送样单》内容，注明样本名称，类型，形态、粒径和参考图。

透射电镜需要举行半薄定位的样本汇总

组织类型	组织部位	半薄定位形貌	需半薄定位的部位举例
空腔组织	消化道	常做的消化道组织有胃、肠道等，从食管至直肠，消化道的管壁分为黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜层，如指定视察4层中某一层或者是4层中的特定结构时，需要定位	如黏膜上皮的微绒毛，黏膜下层的血管、肠腺，肌间神经丛等
	呼吸道	常做的呼吸道组织为肺	如视察肺内的气管、巨噬细胞等
	血管	除部分组织其自己血管富厚不需要定位外，一样平常视察组织内血管均需要定位	如血脑屏障、肿瘤组织内的新生血管等
	其他空腔组织	/	如子宫视察内膜等
实体组织	消化腺	主要有胰腺和肝，如胰腺视察胰岛细胞必需定位，肝脏视察血窦、胆管等特殊位置需要定位	如胰腺视察胰岛细胞、肝脏血窦、胆管等特殊位置
	眼球	视察相关详细部位均需定位	如视网膜、角膜、巩膜等
	脑组织	视察海马、胼胝体、黑质等	视察特定脑区等
	脊髓	视察灰质和白质	视察灰质和白质等
	肾脏	视察肾小球	视察肾小球等
	卵巢	视察卵泡细胞	视察卵泡细胞如等原始、初级、次级细胞等
	睾丸	视察各级生细腻胞	视察各级生细腻胞如精原、初级、次级细胞等
	鼻粘膜	视察纤毛	视察纤毛等
	皮肤	视察表皮、真皮或皮下组织	视察表皮、真皮或皮下组织等
造模后组织	植入质料	视察植入质料的位置	如视察植入质料的位置
	损伤区	视察损伤区	如大脑缺血性坏死区等
	肿瘤	视察癌巢的位置	如提供肿瘤组织时不需定位
植物质料	根	一样平常不需定位	如需视察重金属沉积，请提前咨询
	叶	视察叶脉、胚轴、叶鞘	视察叶脉、胚轴、叶鞘等
	花	视察花粉和花蕊	视察花粉和花蕊等
	果实和种子	一样平常均需定位	如玉米籽粒、番茄、土豆等
	其他空腔组织	蕨类植物	视察孢子等
其他	要定位的组织，第1次取材时规模可以适当增大，以包管二次取材能分清组织的种类与偏向