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细胞、细胞流式采样要求
宣布时间:2024-03-07
作者:sunbet医学

细胞样本寄送要求

1、冷冻贮存运输(冻存株)

干冰运输冻存细胞 。外地寄送时 ,干冰消耗量约为4-5kg/24h(凭证温度会有所变换) ,请凭证寄送时长订购足量干冰 ,用厚实的泡沫箱举行运输 。

2、充液法常温运输(T25瓶)

一样平常选择生长优异的细胞 ,以生长60%~70%为宜 ,去掉旧作育液 ,增补新的作育液至瓶颈部 ,保存微量空气 ,拧紧瓶盖 ,并用封口膜密封 ,放在运送盒内 ,用棉花等做防震防压处置惩罚 。常温 ,抵达目的地后倒出多余的作育液 ,只需保存维持生长所需的作育液置37℃作育 ,越日传代 。

提醒:细胞寄送时 ,需见告细胞名称、作育条件及冻存条件 。

细胞流式检测样本收罗要求

1、流式凋亡样本送样要求

【样本网络】

贴壁细胞:

① 取出孔板(皿) ,小心网络上层清液于对应编号的离心管中留用;

② 用不含EDTA胰酶消化 ,待细胞质回缩 ,细胞之间不再毗连成片 ,则终止消化 ;

③ 吸出悬液到离心管中(与同编号留用液体混淆) ,离心网络细胞 ,加入适量无钙PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

④ 在细胞沉淀中加入适量无钙PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ,离心网络细胞沉淀 ,使用试剂盒自带的binding buffer重悬 ,4℃运输置实验室(细胞量不低于1×10^5为宜) 。

悬浮细胞:

① 取出孔板(皿) ,网络细胞悬液于对应编号的离心管中留用 ;

② 离心网络细胞 ,加入适量无钙PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 在细胞沉淀中加入适量无钙PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ;

④ 离心网络细胞沉淀 ,使用试剂盒自带的binding buffer重悬 ,4℃运输置实验室(细胞量不低于1×10^5为宜) 。

注重事项:

① 使用不含EDTA的胰酶消化网络细胞;

② 用无钙PBS或者binding buffer(1x)重悬于1.5ml尖底EP管中(若是两者均没有 ,则用作育基重悬 ,送到本实验室再举行洗涤与染色) ,4℃运输置实验室 。细胞密度不低于1×10^5 ;

③ 样本运输至实验室后 ,再行染色 ,若样品自己带荧光 ,请提前见告 ;

④ 公司常备试剂盒为:AnnexinV-APC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒(凯基);

⑤ 送样前请至少提前一天预约 ,并见告相关信息(详细例数、检测内容、特殊要求等) 。

2、流式ROS样本送样要求

贴壁细胞:

① 取出孔板(皿) ,用胰酶消化 ,待细胞质回缩 ,细胞之间不再毗连成片 ,则终止消化 ;

② 吸出悬液到离心管中 ,离心网络细胞 ,加入适量PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 在细胞沉淀中加入适量PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ,离心网络细胞沉淀 ;

④ 使用4℃预冷PBS或者无血清作育基重悬 ,4℃运输至实验室(细胞量不低于1×10^6为宜) 。

悬浮细胞:

① 取出孔板(皿) ,离心网络细胞 ,加入适量PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

② 在细胞沉淀中加入适量PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 使用4℃预冷PBS或者无血清作育基重悬 ,4℃运输至实验室(细胞量不低于1×10^6为宜) 。

注重事项:

① 用PBS重悬于1.5ml尖底EP管中(若是没有 ,则用无血清作育基重悬 ,送到本实验室再举行洗涤与染色) ,4℃运输至实验室 。细胞密度不低于1×10^6 ;

② 样本运输至实验室后 ,再行染色 ,若样品自己带荧光 ,请提前见告 ;

③ 公司常备试剂盒为:活性氧检测试剂盒(碧云天);

④ 送样前请至少提前一天预约 ,并见告相关信息(详细例数、检测内容、特殊要求等) 。

3、流式周期样本送样要求

贴壁细胞:

① 吸弃上层作育基 ,PBS洗涤细胞1次 ,吸弃液体 ;

② 胰酶消化 ,待细胞质回缩 ,细胞之间不再毗连成片 ,加入新鲜作育基终止消化并网络悬液于对应编号离心管中 ,离心弃上清 ;

③ 加入适量PBS洗涤2次 ,离心网络细胞沉淀 ;

④ 用75%预冷乙醇重悬细胞 ,低温运输至实验室(细胞量为1×10^6为宜) 。

悬浮细胞:

① 网络细胞悬液于对应编号的离心管中 ,离心网络细胞沉淀 ;

② 加入适量PBS洗涤2次 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 用75%预冷乙醇重悬细胞 ,低温运输至实验室(细胞量为1×10^6为宜) 。

注重事项:

① 周期细胞量为1×10^6为宜 。接纳尖底EP管/离心管 ,运输样本 ,可镌汰后期处置惩罚时样本的消耗 ;

② 牢靠后的细胞 ,4℃可存放一周左右 ,-20℃可存放一个月左右 。短时间内不检测的话 ,建议包管冰乙醇的最终浓度为50%左右 ,阻止样品粘度太高 ,影响后续实验效果 ;

③ 外地送样 ,可在加入75%预冷乙醇牢靠后 ,低温(泡沫盒+冰袋)邮寄至公司 ;

④ 送样前请至少提前一天预约 ,并见告相关信息(详细例数、检测内容、特殊要求等) 。

4、流式JC-1样本送样要求

贴壁细胞:

① 取出孔板(皿) ,用胰酶消化 ,待细胞质回缩 ,细胞之间不再毗连成片 ,则终止消化 ;

② 吸出悬液到离心管中 ,离心网络细胞 ,加入适量PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 在细胞沉淀中加入适量无钙PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ,离心网络细胞沉淀 ;

④ 使用4℃预冷PBS或者无血清作育基重悬 ,4℃运输至实验室(细胞量不低于1×10^6为宜) 。

悬浮细胞:

① 取出孔板(皿) ,离心网络细胞 ,加入适量PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

② 在细胞沉淀中加入适量PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 使用4℃预冷PBS或者无血清作育基重悬 ,4℃运输至实验室(细胞量不低于1×10^6为宜) 。

注重事项:

① 用PBS重悬于1.5ml尖底EP管中(若是没有 ,则用无血清作育基重悬 ,送到本实验室再举行洗涤与染色) ,4℃运输至实验室 。细胞密度不低于1×10^6个/ml ;

② 样本运输至实验室后 ,再行染色 ,若样品自己带荧光 ,请提前见告 ;

③ 公司常备试剂盒为:线粒体膜电位检测检测试剂盒(碧云天) ;

④ 送样前请至少提前一天预约 ,并见告相关信息(详细例数、检测内容、特殊要求等) 。

5、流式组织样本送样

将新鲜组织置于预冷PBS中 ,4℃运输至实验室 。若样品自己带荧光 ,请提前见告 。

6、流式血液样本送样要求

抗凝全血(大大都接纳肝素钠/EDTA抗凝) ,收罗后室温生涯 ,只管2h内送达实验室 。

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细胞、细胞流式采样要求
宣布时间:2024-03-07
作者:sunbet医学

细胞样本寄送要求

1、冷冻贮存运输(冻存株)

干冰运输冻存细胞 。外地寄送时 ,干冰消耗量约为4-5kg/24h(凭证温度会有所变换) ,请凭证寄送时长订购足量干冰 ,用厚实的泡沫箱举行运输 。

2、充液法常温运输(T25瓶)

一样平常选择生长优异的细胞 ,以生长60%~70%为宜 ,去掉旧作育液 ,增补新的作育液至瓶颈部 ,保存微量空气 ,拧紧瓶盖 ,并用封口膜密封 ,放在运送盒内 ,用棉花等做防震防压处置惩罚 。常温 ,抵达目的地后倒出多余的作育液 ,只需保存维持生长所需的作育液置37℃作育 ,越日传代 。

提醒:细胞寄送时 ,需见告细胞名称、作育条件及冻存条件 。

细胞流式检测样本收罗要求

1、流式凋亡样本送样要求

【样本网络】

贴壁细胞:

① 取出孔板(皿) ,小心网络上层清液于对应编号的离心管中留用;

② 用不含EDTA胰酶消化 ,待细胞质回缩 ,细胞之间不再毗连成片 ,则终止消化 ;

③ 吸出悬液到离心管中(与同编号留用液体混淆) ,离心网络细胞 ,加入适量无钙PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

④ 在细胞沉淀中加入适量无钙PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ,离心网络细胞沉淀 ,使用试剂盒自带的binding buffer重悬 ,4℃运输置实验室(细胞量不低于1×10^5为宜) 。

悬浮细胞:

① 取出孔板(皿) ,网络细胞悬液于对应编号的离心管中留用 ;

② 离心网络细胞 ,加入适量无钙PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 在细胞沉淀中加入适量无钙PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ;

④ 离心网络细胞沉淀 ,使用试剂盒自带的binding buffer重悬 ,4℃运输置实验室(细胞量不低于1×10^5为宜) 。

注重事项:

① 使用不含EDTA的胰酶消化网络细胞;

② 用无钙PBS或者binding buffer(1x)重悬于1.5ml尖底EP管中(若是两者均没有 ,则用作育基重悬 ,送到本实验室再举行洗涤与染色) ,4℃运输置实验室 。细胞密度不低于1×10^5 ;

③ 样本运输至实验室后 ,再行染色 ,若样品自己带荧光 ,请提前见告 ;

④ 公司常备试剂盒为:AnnexinV-APC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒(凯基);

⑤ 送样前请至少提前一天预约 ,并见告相关信息(详细例数、检测内容、特殊要求等) 。

2、流式ROS样本送样要求

贴壁细胞:

① 取出孔板(皿) ,用胰酶消化 ,待细胞质回缩 ,细胞之间不再毗连成片 ,则终止消化 ;

② 吸出悬液到离心管中 ,离心网络细胞 ,加入适量PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 在细胞沉淀中加入适量PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ,离心网络细胞沉淀 ;

④ 使用4℃预冷PBS或者无血清作育基重悬 ,4℃运输至实验室(细胞量不低于1×10^6为宜) 。

悬浮细胞:

① 取出孔板(皿) ,离心网络细胞 ,加入适量PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

② 在细胞沉淀中加入适量PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 使用4℃预冷PBS或者无血清作育基重悬 ,4℃运输至实验室(细胞量不低于1×10^6为宜) 。

注重事项:

① 用PBS重悬于1.5ml尖底EP管中(若是没有 ,则用无血清作育基重悬 ,送到本实验室再举行洗涤与染色) ,4℃运输至实验室 。细胞密度不低于1×10^6 ;

② 样本运输至实验室后 ,再行染色 ,若样品自己带荧光 ,请提前见告 ;

③ 公司常备试剂盒为:活性氧检测试剂盒(碧云天);

④ 送样前请至少提前一天预约 ,并见告相关信息(详细例数、检测内容、特殊要求等) 。

3、流式周期样本送样要求

贴壁细胞:

① 吸弃上层作育基 ,PBS洗涤细胞1次 ,吸弃液体 ;

② 胰酶消化 ,待细胞质回缩 ,细胞之间不再毗连成片 ,加入新鲜作育基终止消化并网络悬液于对应编号离心管中 ,离心弃上清 ;

③ 加入适量PBS洗涤2次 ,离心网络细胞沉淀 ;

④ 用75%预冷乙醇重悬细胞 ,低温运输至实验室(细胞量为1×10^6为宜) 。

悬浮细胞:

① 网络细胞悬液于对应编号的离心管中 ,离心网络细胞沉淀 ;

② 加入适量PBS洗涤2次 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 用75%预冷乙醇重悬细胞 ,低温运输至实验室(细胞量为1×10^6为宜) 。

注重事项:

① 周期细胞量为1×10^6为宜 。接纳尖底EP管/离心管 ,运输样本 ,可镌汰后期处置惩罚时样本的消耗 ;

② 牢靠后的细胞 ,4℃可存放一周左右 ,-20℃可存放一个月左右 。短时间内不检测的话 ,建议包管冰乙醇的最终浓度为50%左右 ,阻止样品粘度太高 ,影响后续实验效果 ;

③ 外地送样 ,可在加入75%预冷乙醇牢靠后 ,低温(泡沫盒+冰袋)邮寄至公司 ;

④ 送样前请至少提前一天预约 ,并见告相关信息(详细例数、检测内容、特殊要求等) 。

4、流式JC-1样本送样要求

贴壁细胞:

① 取出孔板(皿) ,用胰酶消化 ,待细胞质回缩 ,细胞之间不再毗连成片 ,则终止消化 ;

② 吸出悬液到离心管中 ,离心网络细胞 ,加入适量PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 在细胞沉淀中加入适量无钙PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ,离心网络细胞沉淀 ;

④ 使用4℃预冷PBS或者无血清作育基重悬 ,4℃运输至实验室(细胞量不低于1×10^6为宜) 。

悬浮细胞:

① 取出孔板(皿) ,离心网络细胞 ,加入适量PBS洗涤1次 ,离心网络细胞沉淀 ;

② 在细胞沉淀中加入适量PBS重悬细胞 ,并将悬液转移至1.5ml尖底EP管中 ,离心网络细胞沉淀 ;

③ 使用4℃预冷PBS或者无血清作育基重悬 ,4℃运输至实验室(细胞量不低于1×10^6为宜) 。

注重事项:

① 用PBS重悬于1.5ml尖底EP管中(若是没有 ,则用无血清作育基重悬 ,送到本实验室再举行洗涤与染色) ,4℃运输至实验室 。细胞密度不低于1×10^6个/ml ;

② 样本运输至实验室后 ,再行染色 ,若样品自己带荧光 ,请提前见告 ;

③ 公司常备试剂盒为:线粒体膜电位检测检测试剂盒(碧云天) ;

④ 送样前请至少提前一天预约 ,并见告相关信息(详细例数、检测内容、特殊要求等) 。

5、流式组织样本送样

将新鲜组织置于预冷PBS中 ,4℃运输至实验室 。若样品自己带荧光 ,请提前见告 。

6、流式血液样本送样要求

抗凝全血(大大都接纳肝素钠/EDTA抗凝) ,收罗后室温生涯 ,只管2h内送达实验室 。

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